Clostridium Difficile -pikatesti
【KÄYTTÖAIKA】
Clostridium difficile on anaerobinen bakteeri, joka toimii opportunistisena taudinaiheuttajana: se kasvaa suolistossa, kun normaali kasvisto on muuttunut antibioottihoidolla. Toksinogeeniset Clostridium difficilen kannat aiheuttavat infektioita lievästä ripulista pseudomembranoottiseen paksusuolitulehdukseen, mikä voi johtaa kuolemaan. Sairauden aiheuttaa kaksi toksiinia, joita tuottavat toksikogeeniset C. difficile -kannat: Toxin A (kudoksia vahingoittava enterotoksiini) ja Toxin B (sytotoksiini). Jotkut kannat tuottavat sekä toksiineja A että B, toiset vain toksiinia B. Kolmannen (binäärisen) toksiinin mahdollisesta roolista patogeenisyydessä keskustellaan edelleen. Glutamaattidehydrogenaasin (GDH) käyttö C. difficilen proliferaation antigeenimarkkerina on osoitettu erittäin tehokkaaksi, koska kaikki kannat tuottavat suuria määriä tätä entsyymiä. Clostridium K-SeT mahdollistaa C.difficilen GDH:n spesifisen havaitsemisen ulostenäytteestä. Näytteitä, joiden Clostridium K-SeT -tulos on positiivinen, tulee tutkia tarkemmin bakteerien toksisuuden testaamiseksi.
【YHTEENVETO】
Clostridia (Clostridium-suvun jäsenet) ovat anaerobisia, liikkuvia bakteereja, joita esiintyy kaikkialla luonnossa ja ne ovat erityisen yleisiä maaperässä. Mikroskoopin alla ne näyttävät pitkiltä, epäsäännöllisiltä (usein tynnyrin- tai karan-muotoisilta) soluilta, joiden päissä on pullistuma. Gram-värjäyksessä C. difficile -solut ovat Gram-positiivisia ja ne kasvavat optimaalisesti veriagarilla ihmisen ruumiinlämpötiloissa ilman happea. Stressaantuessaan bakteerit tuottavat itiöitä, jotka kestävät äärimmäisiä olosuhteita, joita aktiiviset bakteerit eivät siedä. C. difficile voi asettua ihmisen paksusuoleen; sitä esiintyy 2–5 prosentilla aikuisväestöstä. Joskus eri infektioiden antibioottihoidolla on haitallinen vaikutus, joka häiritsee suolistoflooran normaalia tasapainoa, jolloin C. difficile voi dominoida opportunistisesti ja aiheuttaa Clostridium difficile -infektion.
【KÄYTTÖOHJEET】
Anna testilaitteen, testinäytteen ja puskurin tasapainottua huoneenlämpötilaan (15-30°C) ennen testaamista. Katso tämän sarjan menettelykortti. Avaa pussi ja poista laite. Suorita testi heti avaamisen jälkeen. Ilmoita potilaan nimi tai näytenumero laitteeseen (yksi laite näytettä kohti)
1. Avaa FSS-putki ja ota ulostenäyte (A) ruuvilla. Laimennussuhteen on oltava noin 4 % w/v. Varo, ettet ota liian paljon (B1) tai liian vähän näytettä (B2). Nestemäisiä tai puolinestemäisiä näytteitä varten pipetoi 80 μl näytettä mikropipetillä (ei mukana) FSS-pulloon.
2. Aseta ruuvi FSS:ään ja kiristä korkki. Homogenisoi valmistetta vorteksilla (C). Koko ulostenäyte on suspendoitava liuokseen.
3. Katkaise korkin kärki (D) ja annostele 4 tippaa laimennettua näytettä laitteen näytekyvennykseen alla olevan kuvan mukaisesti. Oikean toimituksen varmistamiseksi FSS-pulloa on pidettävä pystyasennossa 4. Anna reagoida 15 minuuttia. Tulokset näkyvät lukuikkunassa.










