【ഉദ്ദേശിച്ച ഉപയോഗം】 

ക്ലോസ്ട്രിഡിയം ഡിഫിസൈൽ ഒരു അവസരവാദ രോഗകാരിയായി പ്രവർത്തിക്കുന്ന ഒരു വായുരഹിത ബാക്ടീരിയയാണ്: ആൻറിബയോട്ടിക്കുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള ചികിത്സയിലൂടെ സാധാരണ സസ്യജാലങ്ങളിൽ മാറ്റം വരുത്തുമ്പോൾ ഇത് കുടലിൽ വളരുന്നു. ക്ലോസ്‌ട്രിഡിയം ഡിഫിസിലിൻ്റെ ടോക്‌സിനോജെനിക് സ്‌ട്രെയിനുകൾ മിൽഡ് ഡയേറിയ മുതൽ സ്യൂഡോമെംബ്രാനസ് വൻകുടൽ പുണ്ണ് വരെയുള്ള അണുബാധകൾക്ക് കാരണമാകുന്നു, ഇത് മരണത്തിലേക്ക് നയിച്ചേക്കാം. C.difficile-ൻ്റെ ടോക്‌സിനോജെനിക് സ്‌ട്രെയിനുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന രണ്ട് ടോക്‌സിനുകൾ മൂലമാണ് രോഗം ഉണ്ടാകുന്നത്: ടോക്‌സിൻ എ (ടിഷ്യു-എൻ്ററോടോക്‌സിൻ നശിപ്പിക്കുന്നു), ടോക്‌സിൻ ബി (സൈറ്റോടോക്‌സിൻ). ചില സ്‌ട്രെയിനുകൾ വിഷങ്ങൾ എയും ബിയും ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു, മറ്റു ചിലത് ടോക്‌സിൻ ബി മാത്രം ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. രോഗകാരികളിൽ മൂന്നാമത്തെ (ബൈനറി) വിഷത്തിൻ്റെ സാധ്യതയുള്ള പങ്ക് ഇപ്പോഴും ചർച്ച ചെയ്യപ്പെടുന്നുണ്ട്. C.difficile പ്രൊലിഫെറേഷൻ്റെ ഒരു ആൻ്റിജൻ മാർക്കറായി Glutamate Dehydrogenase (GDH) ഉപയോഗിക്കുന്നത് വളരെ ഫലപ്രദമാണെന്ന് തെളിയിക്കപ്പെട്ടിട്ടുണ്ട്, കാരണം എല്ലാ സ്‌ട്രെയിനുകളും ഈ എൻസൈമിൻ്റെ ഉയർന്ന അളവിൽ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. ക്ലോസ്ട്രിഡിയം K-SeT മലം മാതൃകയിൽ C.difficile ൻ്റെ GDH നിർദ്ദിഷ്‌ടമായി കണ്ടുപിടിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു. പോസിറ്റീവ് ക്ലോസ്‌ട്രിഡിയം കെ-സെറ്റ് ഫലമുള്ള സാമ്പിളുകൾ ബാക്‌ടീരിയയുടെ ടോക്‌സിജെനിസിറ്റി പരിശോധിക്കാൻ കൂടുതൽ അന്വേഷണം നടത്തണം.

【സംഗ്രഹം】  

ക്ലോസ്ട്രിഡിയ (ക്ലോസ്ട്രിഡിയം ജനുസ്സിലെ അംഗങ്ങൾ) വായുരഹിതവും ചലനാത്മകവുമായ ബാക്ടീരിയകളാണ്, പ്രകൃതിയിൽ സർവ്വവ്യാപിയും പ്രത്യേകിച്ച് മണ്ണിൽ വ്യാപകവുമാണ്. മൈക്രോസ്കോപ്പിന് കീഴിൽ, അവ അവരുടെ അറ്റത്ത് ഒരു ബൾജ് ഉള്ള നീളമുള്ള, ക്രമരഹിതമായ (പലപ്പോഴും മുരിങ്ങയില- അല്ലെങ്കിൽ സ്പിൻഡിൽ-ആകൃതിയിലുള്ള) കോശങ്ങളായി കാണപ്പെടുന്നു. ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗിന് കീഴിൽ, C. ഡിഫിസൈൽ സെല്ലുകൾ ഗ്രാം-പോസിറ്റീവ് ആണ്, കൂടാതെ ഓക്സിജൻ്റെ അഭാവത്തിൽ മനുഷ്യ ശരീര താപനിലയിൽ രക്തത്തിലെ അഗറിൽ ഒപ്റ്റിമൽ വളർച്ച കാണിക്കുന്നു. സമ്മർദ്ദത്തിലായിരിക്കുമ്പോൾ, സജീവമായ ബാക്ടീരിയകൾക്ക് സഹിക്കാൻ കഴിയാത്ത അങ്ങേയറ്റത്തെ അവസ്ഥകൾ സഹിക്കാൻ കഴിയുന്ന ബീജകോശങ്ങൾ ബാക്ടീരിയ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. C. ബുദ്ധിമുട്ട് മനുഷ്യ വൻകുടലിൽ സ്ഥാപിക്കപ്പെട്ടേക്കാം; പ്രായപൂർത്തിയായ ജനസംഖ്യയുടെ 2-5% ൽ ഇത് കാണപ്പെടുന്നു. ചിലപ്പോൾ വിവിധ അണുബാധകൾക്കുള്ള ആൻറിബയോട്ടിക് തെറാപ്പി, ഗട്ട് ഫ്ലോറയുടെ സാധാരണ സന്തുലിതാവസ്ഥയെ തടസ്സപ്പെടുത്തുന്നതിൻ്റെ പ്രതികൂല ഫലമുണ്ടാക്കുന്നു, ഈ സാഹചര്യത്തിൽ C. ഡിഫിസൈൽ അവസരോചിതമായി ആധിപത്യം സ്ഥാപിക്കുകയും ക്ലോസ്ട്രിഡിയം ഡിഫിസൈൽ അണുബാധയ്ക്ക് കാരണമാവുകയും ചെയ്യും.

【ഉപയോഗത്തിനുള്ള നിർദ്ദേശങ്ങൾ】  

ടെസ്‌റ്റിംഗിന് മുമ്പായി റൂം താപനില (15-30°C) സമനിലയിലാക്കാൻ ടെസ്റ്റ് ഉപകരണവും ടെസ്റ്റ് സാമ്പിളും ബഫറും അനുവദിക്കുക. ഈ കിറ്റിലെ നടപടിക്രമ കാർഡ് പരിശോധിക്കുക. സഞ്ചി തുറന്ന് ഉപകരണം നീക്കം ചെയ്യുക. തുറന്നുകഴിഞ്ഞാൽ, ഉടൻ തന്നെ ടെസ്റ്റ് പ്രവർത്തിപ്പിക്കുക. ഉപകരണത്തിൽ രോഗിയുടെ പേരോ മാതൃക നമ്പറോ സൂചിപ്പിക്കുക (സാമ്പിളിന് ഒരു ഉപകരണം)

1. FSS ട്യൂബ് തുറന്ന് സ്റ്റൂൾ സാമ്പിൾ (A) ശേഖരിക്കാൻ സ്ക്രൂ ഉപയോഗിക്കുക. നേർപ്പിക്കൽ അനുപാതം ഏകദേശം 4% w/v ആയിരിക്കണം. വളരെയധികം (B1) അല്ലെങ്കിൽ വളരെ കുറച്ച് മാതൃക (B2) എടുക്കാതിരിക്കാൻ ശ്രദ്ധിക്കുക. ലിക്വിഡ് അല്ലെങ്കിൽ അർദ്ധ-ദ്രാവക സാമ്പിളുകൾക്ക്, എഫ്എസ്എസ് കുപ്പിയിലേക്ക് മൈക്രോപിപെറ്റ് (നൽകിയിട്ടില്ല) ഉപയോഗിച്ച് 80 μL സാമ്പിളിൻ്റെ പൈപ്പറ്റ്.

2. എഫ്എസ്എസിലേക്ക് സ്ക്രൂ ചേർക്കുക, തൊപ്പി ശക്തമാക്കുക. ഏകതാനമാക്കാനുള്ള തയ്യാറെടുപ്പിനെ വോർടെക്‌സ് ചെയ്യുക (C). മുഴുവൻ മലം സാമ്പിളും ലായനിയിൽ സസ്പെൻഡ് ചെയ്യണം.

3. തൊപ്പിയുടെ പോയിൻ്റ് (D) പൊട്ടിച്ച്, താഴെ ചിത്രീകരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ ഉപകരണത്തിൻ്റെ സാമ്പിൾ കിണറ്റിലേക്ക് നേർപ്പിച്ച സാമ്പിളിൻ്റെ 4 തുള്ളി വിതരണം ചെയ്യുക. ശരിയായ ഡെലിവറി ഉറപ്പാക്കാൻ, FSS കുപ്പി ലംബമായി പിടിക്കണം 4. 15 മിനിറ്റ് പ്രതികരിക്കാൻ വിടുക. ഫലങ്ങൾ വായന വിൻഡോയിൽ നിരീക്ഷിക്കുന്നു.