【ಉದ್ದೇಶಿತ ಬಳಕೆ】 

ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಒಂದು ಅವಕಾಶವಾದಿ ರೋಗಕಾರಕವಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುವ ಆಮ್ಲಜನಕರಹಿತ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾವಾಗಿದೆ: ಇದು ಆಂಟಿಬಯಾಟಿಕ್‌ಗಳ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಿಂದ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಸ್ಯವರ್ಗವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸಿದಾಗ ಕರುಳಿನಲ್ಲಿ ಬೆಳೆಯುತ್ತದೆ. ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ ಡಿಫಿಸಿಲ್‌ನ ಟಾಕ್ಸಿನೋಜೆನಿಕ್ ಸ್ಟ್ರೈನ್‌ಗಳು ಮೈಲ್ಡ್ ಡೈರಿಯಾದಿಂದ ಸ್ಯೂಡೋಮೆಂಬ್ರಾನಸ್ ಕೊಲೈಟಿಸ್‌ಗೆ ಸೋಂಕಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ, ಇದು ಸಾವಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು. C.difficile ನ ಟಾಕ್ಸಿನೋಜೆನಿಕ್ ತಳಿಗಳಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ಎರಡು ವಿಷಗಳಿಂದ ರೋಗ ಉಂಟಾಗುತ್ತದೆ: ಟಾಕ್ಸಿನ್ A (ಅಂಗಾಂಶ-ಹಾನಿಕಾರಕ ಎಂಟರೊಟಾಕ್ಸಿನ್) ಮತ್ತು ಟಾಕ್ಸಿನ್ ಬಿ (ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿನ್). ಕೆಲವು ತಳಿಗಳು ಎ ಮತ್ತು ಬಿ ಎರಡನ್ನೂ ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ, ಇನ್ನು ಕೆಲವು ಟಾಕ್ಸಿನ್ ಬಿ ಅನ್ನು ಮಾತ್ರ ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತವೆ. ರೋಗಕಾರಕತೆಯಲ್ಲಿ ಮೂರನೇ (ಬೈನರಿ) ವಿಷದ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪಾತ್ರವು ಇನ್ನೂ ಚರ್ಚೆಯಲ್ಲಿದೆ. ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ (GDH) ಅನ್ನು C. ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಪ್ರಸರಣದ ಪ್ರತಿಜನಕ ಮಾರ್ಕರ್ ಆಗಿ ಬಳಸುವುದು ತುಂಬಾ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಏಕೆಂದರೆ ಎಲ್ಲಾ ತಳಿಗಳು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಈ ಕಿಣ್ವವನ್ನು ಉತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡುತ್ತವೆ. ಕ್ಲಾಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ K-SeT ಸ್ಟೂಲ್ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ C.difficile ನ GDH ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪತ್ತೆಗೆ ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ. ಧನಾತ್ಮಕ ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ K-SeT ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ವಿಷಕಾರಕತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಮತ್ತಷ್ಟು ತನಿಖೆ ಮಾಡಬೇಕು.

【ಸಾರಾಂಶ】  

ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಾ (ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ ಕುಲದ ಸದಸ್ಯರು) ಆಮ್ಲಜನಕರಹಿತ, ಚಲನಶೀಲ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ಪ್ರಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ಸರ್ವತ್ರ ಮತ್ತು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಮಣ್ಣಿನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚಲಿತವಾಗಿದೆ. ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ, ಅವುಗಳು ಉದ್ದವಾದ, ಅನಿಯಮಿತ (ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಡ್ರಮ್ ಸ್ಟಿಕ್- ಅಥವಾ ಸ್ಪಿಂಡಲ್-ಆಕಾರದ) ಕೋಶಗಳಂತೆ ಅವುಗಳ ಟರ್ಮಿನಲ್ ತುದಿಗಳಲ್ಲಿ ಉಬ್ಬುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. ಗ್ರಾಂ ಸ್ಟೆನಿಂಗ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ, C. ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಕೋಶಗಳು ಗ್ರಾಂ-ಪಾಸಿಟಿವ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಆಮ್ಲಜನಕದ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾನವ ದೇಹದ ಉಷ್ಣತೆಯಲ್ಲಿ ರಕ್ತದ ಅಗರ್‌ನಲ್ಲಿ ಗರಿಷ್ಠ ಬೆಳವಣಿಗೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ. ಒತ್ತಡಕ್ಕೆ ಒಳಗಾದಾಗ, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಸ್ಪೋರ್‌ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಅದು ಸಕ್ರಿಯ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾಗಳು ಸಹಿಸಲಾಗದ ತೀವ್ರ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳನ್ನು ಸಹಿಸಿಕೊಳ್ಳಬಲ್ಲವು. C. ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಮಾನವನ ಕೊಲೊನ್‌ನಲ್ಲಿ ಸ್ಥಾಪಿತವಾಗಬಹುದು; ಇದು ವಯಸ್ಕ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ 2-5% ರಷ್ಟು ಇರುತ್ತದೆ. ಕೆಲವೊಮ್ಮೆ ವಿವಿಧ ಸೋಂಕುಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಜೀವಕ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯು ಕರುಳಿನ ಸಸ್ಯವರ್ಗದ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸಮತೋಲನವನ್ನು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುವ ಪ್ರತಿಕೂಲ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ C. ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಅವಕಾಶವಾದಿಯಾಗಿ ಪ್ರಾಬಲ್ಯ ಸಾಧಿಸಬಹುದು, ಇದು ಕ್ಲೋಸ್ಟ್ರಿಡಿಯಮ್ ಡಿಫಿಸಿಲ್ ಸೋಂಕಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.

【ಬಳಕೆಗೆ ನಿರ್ದೇಶನಗಳು】  

ಪರೀಕ್ಷಾ ಸಾಧನ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಮೊದಲು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶ (15-30 °C) ಗೆ ಸಮೀಕರಿಸಲು ಅನುಮತಿಸಿ. ದಯವಿಟ್ಟು ಈ ಕಿಟ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ ಕಾರ್ಡ್ ಅನ್ನು ಉಲ್ಲೇಖಿಸಿ. ಚೀಲವನ್ನು ತೆರೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಸಾಧನವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿ. ತೆರೆದ ನಂತರ, ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ತಕ್ಷಣವೇ ಚಲಾಯಿಸಿ. ಸಾಧನದಲ್ಲಿ ರೋಗಿಯ ಹೆಸರು ಅಥವಾ ಮಾದರಿ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸಿ (ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಗೆ ಒಂದು ಸಾಧನ)

1. FSS ಟ್ಯೂಬ್ ತೆರೆಯಿರಿ ಮತ್ತು ಸ್ಟೂಲ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು (A) ಸಂಗ್ರಹಿಸಲು ಸ್ಕ್ರೂ ಬಳಸಿ. ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆ ಅನುಪಾತವು ಸುಮಾರು 4% w/v ಆಗಿರಬೇಕು. ಹೆಚ್ಚು (B1) ಅಥವಾ ತುಂಬಾ ಕಡಿಮೆ ಮಾದರಿ (B2) ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳದಂತೆ ನೋಡಿಕೊಳ್ಳಿ. ದ್ರವ ಅಥವಾ ಅರೆ-ದ್ರವ ಮಾದರಿಗಳಿಗಾಗಿ, 80 μL ಮಾದರಿಯ ಪೈಪೆಟ್ ಅನ್ನು ಮೈಕ್ರೊಪಿಪೆಟ್ ಬಳಸಿ (ಒದಗಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ) FSS ಸೀಸೆಗೆ.

2. FSS ಗೆ ಸ್ಕ್ರೂ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಿ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಪ್ ಅನ್ನು ಬಿಗಿಗೊಳಿಸಿ. ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಲು (C) ಸಿದ್ಧತೆಯನ್ನು ಸುಳಿಯಿರಿ. ಸಂಪೂರ್ಣ ಸ್ಟೂಲ್ ಮಾದರಿಯನ್ನು ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಬೇಕು.

3. ಕ್ಯಾಪ್ (ಡಿ) ಬಿಂದುವನ್ನು ಒಡೆದು ಮತ್ತು ಕೆಳಗೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಸಾಧನದ ಮಾದರಿ ಬಾವಿಗೆ 4 ಹನಿಗಳನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ವಿತರಿಸಿ. ಸರಿಯಾದ ವಿತರಣೆಯನ್ನು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು, FSS ಸೀಸೆಯನ್ನು ಲಂಬವಾಗಿ ಹಿಡಿದಿರಬೇಕು 4. 15 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯಿಸಲು ಬಿಡಿ. ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಓದುವ ವಿಂಡೋದಲ್ಲಿ ವೀಕ್ಷಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.