Clostridium Difficile արագ թեստ
【ՆԱԽԱՏԵՍՎԱԾ ՕԳՏԱԳՈՐԾՈՒՄ】
Clostridium difficile-ը անաէրոբ բակտերիա է, որը գործում է որպես օպորտունիստական պաթոգեն. այն աճում է աղիներում, երբ նորմալ ֆլորան փոխվել է հակաբիոտիկներով բուժման արդյունքում: Clostridium difficile-ի տոքսինոգեն շտամներն առաջացնում են ինֆեկցիաներ՝ թեթև փորլուծությունից մինչև կեղծ մեմբրանային կոլիտ, ինչը կարող է հանգեցնել մահվան: Հիվանդությունը առաջանում է C.difficile-ի տոքսինոգեն շտամների կողմից արտադրվող երկու տոքսիններից՝ տոքսին A (հյուսվածք-վնասող էնտերոտոքսին) և տոքսին B (ցիտոտոքսին): Որոշ շտամներ արտադրում են և՛ A, և՛ B տոքսիններ, որոշ այլ շտամներ արտադրում են միայն տոքսին B: Երրորդ (երկուական) տոքսինի հնարավոր դերը պաթոգենության մեջ դեռևս քննարկվում է: Ցուցադրվել է, որ գլյուտամատ դեհիդրոգենազի (GDH) օգտագործումը որպես C.difficile-ի տարածման հակագեն մարկեր շատ արդյունավետ է, քանի որ բոլոր շտամներն արտադրում են այս ֆերմենտի մեծ քանակություն: Clostridium K-SeT-ը թույլ է տալիս հատուկ հայտնաբերել C.difficile-ի GDH-ը կղանքի նմուշում: Դրական Clostridium K-SeT արդյունքով նմուշները պետք է հետագայում ուսումնասիրվեն` բակտերիաների թունավորությունը ստուգելու համար:
【ԱՄՓՈՓՈՒՄ】
Clostridia-ն (Clostridium ցեղի անդամները) անաէրոբ, շարժուն բակտերիաներ են, որոնք ամենուր տարածված են բնության մեջ և հատկապես տարածված են հողում: Մանրադիտակի տակ դրանք հայտնվում են որպես երկար, անկանոն (հաճախ թմբուկավոր- կամ լիսեռի ձևավորված) բջիջներ՝ իրենց տերմինալ ծայրերում ուռուցիկությամբ: Գրամ ներկման դեպքում C. difficile բջիջները գրամ-դրական են և ցույց են տալիս արյան ագարի վրա օպտիմալ աճ՝ մարդու մարմնի ջերմաստիճանում՝ թթվածնի բացակայության դեպքում: Սթրեսի դեպքում բակտերիաները արտադրում են սպորներ, որոնք ունակ են հանդուրժել ծայրահեղ պայմանները, որոնք ակտիվ բակտերիաները չեն կարող հանդուրժել: C. difficile-ը կարող է հաստատվել մարդու հաստ աղիքում; այն առկա է չափահաս բնակչության 2–5%-ում։ Երբեմն տարբեր ինֆեկցիաների հակաբիոտիկ թերապիան ունենում է աղիքային ֆլորայի նորմալ հավասարակշռությունը խախտելու անբարենպաստ ազդեցություն, որի դեպքում C. difficile-ը կարող է պատեհապաշտորեն գերակշռել՝ առաջացնելով Clostridium difficile վարակը:
【ՕԳՏԱԳՈՐԾՄԱՆ ՑՈՒՑՈՒՄՆԵՐ】
Թույլ տվեք, որ փորձարկման սարքը, փորձանմուշը և բուֆերը հավասարակշռվեն սենյակային ջերմաստիճանի (15-30°C) նախքան փորձարկումը: Խնդրում ենք ծանոթանալ այս փաթեթի ընթացակարգային քարտին: Բացեք քսակը և հեռացրեք սարքը: Բացելուց հետո անմիջապես կատարեք թեստը: Նշեք հիվանդի անունը կամ նմուշի համարը սարքի վրա (մեկ սարք յուրաքանչյուր նմուշի համար)
1. Բացեք FSS խողովակը և պտուտակով հավաքեք աթոռի նմուշը (A): Նոսրացման հարաբերակցությունը պետք է լինի մոտ 4% w/v: Զգույշ եղեք, որ չվերցնեք շատ (B1) կամ շատ քիչ նմուշ (B2): Հեղուկ կամ կիսահեղուկ նմուշների համար 80 մկլ նմուշ մտցրեք միկրոպիպետի միջոցով (չի տրամադրվում) FSS սրվակի մեջ:
2. Պտուտակը մտցրեք FSS-ի մեջ և ամրացրեք գլխարկը: Պտտեք պատրաստուկը՝ համասեռացման համար (C): Ամբողջ կղանքի նմուշը պետք է կասեցվի լուծույթի մեջ:
3. Կտրեք կափարիչի կետը (D) և նոսրացված նմուշի 4 կաթիլ թափեք սարքի նմուշի հորի մեջ, ինչպես ցույց է տրված ստորև: Պատշաճ առաքում ապահովելու համար FSS սրվակը պետք է պահվի ուղղահայաց 4: Թողեք արձագանքելու համար 15 րոպե: Արդյունքները դիտվում են ընթերցման պատուհանում:
