【КОЛДОНУУ】 

Clostridium difficile шарттуу патогендин ролун аткарган анаэробдук бактерия: антибиотиктер менен дарылоо аркылуу кадимки флора өзгөргөндө, ичегиде өсөт. Clostridium difficile токсиногендик штаммдары жеңил диареядан псевдомембраноздук колитке чейин инфекцияларды пайда кылып, өлүмгө алып келиши мүмкүн. Оору C.difficile токсиногендик штаммдары тарабынан өндүрүлгөн эки токсинден келип чыгат: токсин А (тканды-бузуучу энтеротоксин) жана токсин В (цитотоксин). Кээ бир штаммдар А жана В токсиндерин, кээ бирлери В токсиндерин гана чыгарышат. Үчүнчү (экилик) токсиндин патогендүүлүктөгү потенциалдуу ролу дагы эле талаш-тартышта. C.difficile пролиферациясынын антиген маркери катары глутаматдегидрогеназаны (GDH) колдонуу абдан эффективдүү көрсөтүлдү, анткени бардык штаммдар бул ферменттин жогорку көлөмүн өндүрөт. Clostridium K-SeT заң үлгүсүндө C.difficile GDH спецификалык аныктоого мүмкүндүк берет. Оң Clostridium K-SeT натыйжасы бар үлгүлөр, бактериялардын токсигендигин текшерүү үчүн андан ары изилдениши керек.

【КЫСКАЧА】  

Clostridia (Clostridium түркүмүнүн мүчөлөрү) – анаэробдук, кыймылдуу бактериялар, табиятта бардык жерде таралган жана өзгөчө топуракта кеңири таралган. Микроскоптун астында алар узун, туура эмес (көбүнчө барабан- же шпиндель формасындагы) клеткалар, соңку учтарында томпосу менен көрүнөт. Грам менен боёгондо C. difficile клеткалары Грам-оң жана кычкылтек жок болгон шартта адамдын денесинин температурасында кан агарында оптималдуу өсүүнү көрсөтөт. Стресс болгондо, бактериялар активдүү бактериялар көтөрө албаган экстремалдык шарттарга чыдай алган спораларды чыгарышат. C. difficile адамдын жоон ичегисинде орношу мүмкүн; ал чоң кишилердин 2–5%ында кездешет. Кээде ар кандай инфекциялар үчүн антибиотик терапиясы ичеги флорасынын нормалдуу балансын бузууга терс таасирин тийгизет, мында C. difficile оппортунисттик түрдө үстөмдүк кылып, Clostridium difficile инфекциясын пайда кылышы мүмкүн.

【КОЛДОНУУГА БАГЫТТАР】  

Сыноодон мурун тестирлөөчү түзүлүшкө, сынамык үлгүсүнө жана буферге бөлмө температурасына (15-30°C) теңдешине уруксат бериңиз. Сураныч, бул топтомдогу процедура картасын караңыз. Баштыкты ачып, түзмөктү алып салыңыз. Ачылгандан кийин, дароо тестти иштетиңиз. Түзмөктө бейтаптын атын же үлгү номерин көрсөтүңүз (ар бир үлгүгө бир түзмөк)

1. FSS түтүгүн ачып, заъдын үлгүсүн чогултуу үчүн бураманы колдонуңуз (A). Суюлтуу катышы болжол менен 4% w/v болушу керек. Өтө көп (B1) же өтө аз үлгү (B2) алуудан сак болуңуз. Суюк же жарым суюк үлгүлөр үчүн FSS флаконуна микропипетти (берилбейт) колдонуп 80 мкл үлгүнү пипетка менен куюңуз.

2. Бураманы FSSке киргизип, капкакты бекемдеңиз. Даярдоону гомогенизациялоо (C). Заъдын бүт үлгүсү эритмеге суспензияланышы керек.

3. Капкактын (D) чекитинен үзүп, төмөндө көрсөтүлгөндөй, суюлтулган үлгүнүн 4 тамчысын аппараттын үлгү кудугуна тамызыңыз. Туура жеткирүүнү камсыз кылуу үчүн FSS флакон вертикалдуу кармалышы керек 4. 15 мүнөткө реакцияга калтырыңыз. Натыйжалар окуу терезесинде байкалат.